Dapatkan Informasi Lengkap Antibodi Monoklonal dan Kegunaannya

Darah terdiri dari dua komponen utama, berbagai jenis sel dan cairan yang disebut serum. Serum terdiri dari populasi antibodi yang heterogen. Antibodi yang berbeda diproduksi oleh berbagai jenis limfosit B.

Karenanya, serum terdiri dari berbagai jenis antibodi yang sering disebut antibodi poliklonal. Antibodi berikatan dengan domain spesifik antigen (disebut determinan antigenik atau epitop) dan menetralisirnya.

  1. Antibodi Monoklonal (MoAb) :

Satu jenis antibodi yang ditujukan terhadap epitop spesifik dan diproduksi oleh garis sel hibridoma disebut antibodi monoklonal (yaitu sediaan yang mengandung antibodi identik).

Sel plasma (sel B yang diproses dengan baik) menghasilkan antibodi IgM (merah) dan IgG (hijau), antibodi tetapi tidak pernah membelah lebih jauh. Sebaliknya sel myeloma (limfosit kanker sumsum tulang) tidak pernah menghasilkan antibodi tetapi membelah dengan cepat secara in vitro.

Pada tahun 1975, untuk pertama kalinya George Kohler dan Cesar Milstein memproduksi sel-B dari limpa setelah tikus diimunisasi dengan antigen. Mereka menyatukan sel-B (sel penghasil antibodi) dan sel myeloma (sel kanker) dengan adanya polietilen glikol (PEG). Akibatnya sel-B menjadi abadi, determinan antigenik.

Sel-sel yang menyatu itu disebut sel hibrid atau hibridoma. Teknologi hibridoma memecahkan kedua kesulitan ini. Sel hibrid memiliki sifat dari kedua sel yaitu kemampuan sekresi antibodi dan pembelahan sel tanpa batas.

Ketika setiap sel hibrid j ditumbuhkan dalam media kultur WS, ia mengeluarkan antibodi spesifik epitop yang disebut S-10.5: Sel berinti banyak menunjukkan fusi, antibodi monoklonal.

Dalam beberapa tahun terakhir, produksi MoAb dilakukan secara komersial dengan menggunakan kultur skala besar dalam fermentor pengangkat udara atau bioreaktor lainnya. Sekitar 50 mg/ml antibodi dapat diproduksi. Sejak tahun 1980, ratusan antibodi monoklonal telah diproduksi secara komersial dan tersedia di pasar Amerika Serikat, Eropa dan Asia termasuk India.

Baru-baru ini, bioteknologi mendapatkan banyak popularitas setelah produksi MoAb melalui teknologi hibridoma. Dengan menggunakan teknologi ini, Anda dapat membuat hibridoma yang menghasilkan antibodi terhadap hampir semua antigen.

Namun, dimungkinkan untuk mengidentifikasi banyak Antibodi berbeda yang disekresikan oleh hibridoma hibridoma yang menghasilkan antibodi terhadap klon tertentu disebut antibodi monoklonal, antigen. Setiap antibodi mengenali epitop yang berbeda atau fitur struktural spesifik dari antigen. Karenanya MoAb sangat spesifik.

  1. Aplikasi Antibodi Monoklonal :

Antibodi monoklonal digunakan dalam empat cara utama yaitu diagnosis penyakit, pengobatan penyakit, imunisasi pasif dan deteksi dan pemurnian biomolekul. Namun, eksploitasi mereka untuk berbagai kegunaan didasarkan pada dua fitur: (i) menuntut spesifisitas pengikatan antibodi, dan (ii) adanya struktur serupa dari semua molekul antibodi.

(a) Diagnosis Penyakit:

Menggunakan MoAb kondisi medis dan penyakit penderita dapat didiagnosis. Salah satu pendekatannya adalah strategi ‘antibody-sandwich’ yang juga disebut ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).

Antigen peredaran darah dalam darah dapat diuji menggunakan teknik ELISA atau radio-immuno assay (RIA). Dengan menggunakan ELISA Anda dapat menguji HIV, hepatitis, tipus, herpes, dll. Untuk setiap tes, kit ELISA terpisah digunakan.

Sediaan antibodi monoklonal ditempelkan pada permukaan cawan plastik yang disebut sumur. Kemudian larutan yang mengandung antigen ditambahkan. Solusinya dicuci untuk menghilangkan antigen yang tidak terikat. Sediaan antibodi monoklonal kedua (melekat dengan alkaline phosphatase atau enzim lain) ditambahkan ke sumur.

Jika antigen spesifik dilekatkan pada MoAb pertama, antibodi kedua akan mengikat enzim yang menempel pada permukaan cawan sebagai sandwich antibodi berlabel antibodi-antigen-enzim.

Jika tidak ada antigen, tidak ada enzim yang akan menempel. Ketika substrat untuk enzim ditambahkan, produk berwarna muncul yang menegaskan adanya antigen.

ELISA digunakan untuk mendiagnosis HIV, Kanker, virus Epstein-Barr serta tes kehamilan, untuk memeriksa daging apakah ada mikroba patogen (atau toksinnya) seperti faringitis streptokokus.

(b) Pengobatan Penyakit:

MoAb memiliki sifat pengikatan antigen yang sangat spesifik. Ini menjadikan mereka kandidat ideal untuk digunakan dalam terapi penyakit.

Antibodi Monoklonal Terapeutik -OKT3:

Jalur metabolisme tertentu diblokir secara selektif oleh MoAb. Jika antigen hadir pada membran sel, itu dinetralkan oleh antibodi spesifik. Jadi antibodi menonaktifkan ‘antigen permukaan sel spesifik’ yang ada pada sel T.

Cell-mediated immune system (CMI) memainkan peran kunci selama transplantasi organ atau sumsum tulang. Sel-T dari sistem CMI menolak salah satu jaringan asing yang ditransplantasikan. Oleh karena itu, pasien menjalani terapi imunosupresif setelah transplantasi organ.

Para pasien diberikan obat imunosupresif untuk menekan sel-T. Kalau tidak, operasi transplantasi akan gagal. MoAb dapat digunakan secara selektif untuk menghilangkan populasi sel-T yang bertanggung jawab atas penolakan transplantasi. Perawatan ini telah berhasil dalam transplantasi ginjal (ginjal).

CD3 adalah antigen yang ada pada permukaan sel T dewasa (limfosit). Jika populasi sel-T habis, penolakan organ transplantasi seluler tidak terjadi.

Antibodi yang bekerja melawan antigen permukaan CD3 dari sel-T disebut OKT3 yaitu anti-CD3 MoAb. OKT3 menghilangkan sel-T yang mengandung antigen dari sirkulasi darah dan dari allograft (lihat Kotak 10.1). Oleh karena itu, OKT3 dapat digunakan untuk mencegah penolakan allograft ginjal akut pada manusia. OKT3 juga telah digunakan untuk membersihkan sumsum tulang donor sebelum digunakan dalam transplantasi sumsum.

(c) Imunisasi Pasif:

Imunisasi pasif mengacu pada transfer antibodi dari satu orang ke orang lain. Sebagai contoh, pemberian antivenom pada pasien gigitan ular termasuk dalam kategori ini.

Penggunaan MoAb dilakukan untuk imunisasi pasif terhadap penyakit tertentu. Obat berbasis MoAb yang disetujui sudah digunakan untuk mengobati syok septik (serangkaian gejala yang muncul karena adanya racun tertentu di dinding sel banyak bakteri menular).

(d) Deteksi dan Pemurnian Biomolekul:

MoAb sangat berguna dalam menentukan keberadaan dan jumlah protein spesifik melalui teknik Western Blotting. Pertama, protein dari berbagai sampel disiapkan dan dipisahkan dengan elektroforesis gel poliakrilamida (PAGE). Pita protein dipindahkan ke filter nitroselulosa.

Western blot yang dihasilkan diinkubasi dengan antibodi primer. Antibodi akan mengikat jika antigen spesifik hadir. Pengikatan ini akan memungkinkan antibodi sekunder yang diberi tag pada pewarna tertentu digunakan untuk menemukan yang pertama. Western blot difoto untuk menunjukkan lokasi yang tepat dari antigen sebagai pita gelap.

Related Posts