Dapatkan Informasi Lengkap Tes Kehamilan Menggunakan Metode Imunologi

Tes Kehamilan dengan Menggunakan Metode Imunologi

  1. Objektif :

Deteksi tes kehamilan dengan menggunakan metode imunologi.

  1. pengantar :

Kehamilan merupakan tahap pembuahan pada wanita yang dapat dideteksi pada tahap awal dengan menggunakan metode imunologi. Namun, tes ini didasarkan pada adanya hormon human chorionic gonadotropin (hCG). Ini adalah glikoprotein yang terdiri dari inti protein dengan rantai karbohidrat bercabang yang sering diakhiri dengan asam sialat.

Ini diproduksi oleh sel-sel trofoblas plasenta sekitar 10 hari setelah pembuahan, dan ditemukan dalam urin wanita hamil. HCG adalah peredup yang terdiri dari dua sub-unit, alfa dan beta.

Struktur molekul hCG mirip dengan hormon glikoprotein lain yang ditemukan dalam urin seperti hormon luteinising (LH), hormon perangsang folikel (FSH), dan hormon perangsang tiroid (TSH).

Setelah lima minggu periode menstruasi terakhir (LMP), konsentrasi hCG meningkat tajam dalam urin dan mencapai tingkat puncaknya pada usia kehamilan 10 minggu (LMP). Selama trimester pertama mencapai 1,00,000 mlU/ml (IU, satuan internasional) yang lebih akurat dan terkait dengan aktivitas gonadotropik spesifik 0,1 mg standar kering yang disimpan di National Institute for Medical Research (London).

Ada beberapa metode yang dikembangkan untuk tes kehamilan tetapi yang paling akurat dan cepat adalah metode imunologi seperti tes aglutinasi partikel lateks, tes imunoasai kromatografi, dll.

  1. Uji Penghambatan Lateks-Aglutinasi
  2. Prinsip :

Dasar dari tes kehamilan adalah tes pengikatan kompetitif. Segera setelah konsepsi tingkat hCG meningkat pesat yang digunakan sebagai penanda untuk tes kehamilan. Dalam tes ini, sejumlah kecil urin dicampur dengan antibodi anti-hCG. Kemudian reagen hCG – digabungkan ditambahkan dan campuran ditunggu untuk reaksi yang tepat. Wanita yang tidak hamil tidak mengandung hCG.

Oleh karena itu, koagulasi antibodi terjadi karena antibodi anti-hCG bebas bereaksi dengan hCG yang digabungkan dengan lateks. Di sisi lain, tidak ada aglutinasi yang terjadi setelah menggunakan urin dari wanita hamil karena anti-hCG akan dinetralkan dan tidak akan bereaksi dengan antigen hCG yang digabungkan dengan lateks.

  1. Persyaratan :

I. Sampel urin pagi pertama (wanita hamil dalam wadah kaca bersih yang steril), slide kaca

  1. Penetes, tongkat pencampur kayu

iii. Antibodi anti-hCG, antigen (suspensi partikel lateks polistiren yang digabungkan dengan hCG secara kimiawi)

  1. Prosedur :

(i) Kumpulkan urine ibu hamil dalam wadah gelas bersih steril yang seharusnya bebas dari sabun atau deterjen.

(ii) Teteskan setetes urine (spesimen atau kontrol) pada slide kaca dengan menggunakan pipet bersih.

(iii) Ambil setetes serum anti-hCG dalam penetes bersih dan letakkan di atas kaca obyek yang bersih.

(iv) Masukkan satu tetes urine ke dalam serum anit-hCG, aduk rata selama 30 detik dengan tongkat pencampur.

(v) Sekarang tambahkan 1-2 tetes antigen (suspensi partikel lateks berlapis hCG) dan campur dengan tongkat bersih secara menyeluruh.

(vr) Goyang slide dengan sangat lambat dan lembut selama tidak lebih dari 90 detik dan amati aglutinasi.

  1. Hasil :

Jika urin tidak mengandung hCG (wanita tidak hamil), antiserum tambahan tidak akan dinetralkan. Ketika suspensi lateks berlapis hCG ditambahkan, antiserum yang masih aktif bereaksi dengan hCG menyebabkan aglutinasi yaitu pembentukan penggumpalan. Dengan demikian, suspensi partikel lateks yang merata menunjukkan hasil yang positif.

Di sisi lain, aglutinasi menunjukkan hasil negatif. Dalam kasus proteinuria, hasil positif palsu dapat terjadi.

  1. Diskusi :

Diskusikan hasil berikut teks.

  1. Uji Penghambatan Hemaglutinasi
  2. Prinsip :

Dalam tes ini digunakan serum anti-hCG dan sel darah merah yang peka. Serum anti-hCG dinetralkan tanpa efek sel darah merah yang peka. Oleh karena itu, sel darah merah dikumpulkan di bagian bawah tabung memberikan tes positif. Namun, jika hCG tidak ada dalam urin, reaksi ini tidak akan terjadi.

  1. Persyaratan :

I. Tabung reaksi kecil steril

  1. Sampel urin (dari wanita hamil)

iii. Serum anti-hCG

  1. Sel darah merah yang tersensitisasi
  2. Prosedur :

(i) Kumpulkan sampel urin dalam botol kaca bersih seperti yang dijelaskan sebelumnya dan encerkan dengan air suling.

(jika) Ambil 1-2 tetes serum anti-hCG dalam tabung kaca.

(iii) Tambahkan 1-2 tetes urine (sampel uji) dengan serum anti-hCG dan aduk rata.

(iv) Tambahkan 1-2 tetes sel darah merah peka ke dalam suspensi.

  1. Hasil :

Jika urin mengandung hCG, serum anti-hCG akan dinetralkan dan sel darah merah yang peka tidak akan terpengaruh. Sel darah merah akan berkumpul di bagian bawah tabung dan membentuk cincin yang memberikan hasil positif. Sebaliknya, jika urin kekurangan hCG, antiserum aktif akan menggumpalkan sel darah merah dan membentuk lapisan yang tersebar merata di bagian bawah tabung reaksi yang menunjukkan hasil negatif. Tes ini tidak dipengaruhi oleh proteinuria.

  1. Diskusi :

Diskusikan hasil berikut teks.

  1. Metode Immunoassay Kromatografi :
  2. Prinsip :

Anti-(a) hCG dilapisi pada membran yang menangkap antibodi pada daerah pita uji dan anti-tikus kambing pada daerah pita kontrol. Partikel emas koloid dilapisi dengan antibodi monoklonal anti-(P) hCG tikus. Selama pengujian, urin dibiarkan bereaksi dengan partikel emas. Campuran bergerak sepanjang membran dengan aksi kapiler secara kromatografi.

Pita berwarna ungu dengan antibodi spesifik (anti antibodi a-hCG anti P) – kompleks partikel emas koloid akan terbentuk pada membran di daerah pita uji. Ini memberikan hasil yang positif. Hasil negatif diperoleh jika pita berwarna ungu di wilayah pita uji tidak ada.

Pita berwarna ungu di daerah kontrol akan selalu muncul karena daerah kontrol mengandung antibodi anti-tikus kambing yang bereaksi dengan anti-(3 hCG monoklonal antibodi monoklonal tikus yang dilapisi partikel emas. Ini tidak terjadi sehubungan dengan fakta apakah mereka telah mengikat hCG atau tidak.

  1. Persyaratan :

I. Emas koloid anti-hCG monoklonal

  1. Anti-hCG poliklonal dilapisi pada membran.
  2. Prosedur :

(i) Keluarkan satu strip pengujian dari kantongnya.

(ii) Pegang strip dengan hati-hati secara vertikal dan celupkan ke dalam urin selama 3 hingga 5 detik (jangan merendam strip untuk melewati garis maksimum).

(iii) Keluarkan strip dari sampel urin, simpan pada lembar non-absorben dan tunggu selama 5 menit untuk interpretasi hasil.

  1. Hasil :

Hasilnya ditafsirkan seperti di bawah ini:

(saya) Uji Positif:

Jika terdapat dua garis berwarna ungu pada strip, ini menunjukkan bahwa hasil spesimen mengandung hCG dan harus ditafsirkan sebagai hasil positif.

(ii) Hasil Negatif:

Perkembangan hanya satu pita warna ungu pada strip menunjukkan bahwa spesimen urin tidak mengandung tingkat hCG yang dapat dideteksi dan ditafsirkan sebagai hasil negatif.

(iii) Hasil Tidak Valid:

Jika tidak ada pita berwarna ungu di area yang ditandai pada jendela hasil, hasil tes tidak valid. Jika volume spesimen yang ditambahkan ke dalam kit uji tidak mencukupi, pita kontrol tidak akan muncul. Ini karena prosedur yang benar belum diikuti dalam pengujian atau perangkat pengujian mungkin telah rusak. Dalam situasi seperti itu prosedur pengujian harus diulangi dengan menggunakan test kit yang baru.

Related Posts